Multiplex Immunohistochemistry（mIHC，多重免疫组化）技术服务是基于酪胺信号放大（TSA）技术的一站式病理检测服务，能在单一组织切片上实现多靶标同步检测与定量分析，是解析组织微环境、疾病机制的核心工具。以下从技术原理、核心优势、服务内容、样本要求、服务流程、交付标准、应用领域七大维度，详细拆解 mIHC 技术服务的核心信息。
一、技术原理
mIHC 依托酪胺信号放大（TSA）技术实现多靶标检测，核心流程为：
一抗与靶抗原结合后，加入耦联辣根过氧化物酶（HRP）的二抗；
HRP 催化荧光素标记的酪胺分子活化，使其与抗原附近的酪氨酸残基共价结合，实现信号放大（灵敏度较传统 IHC 提升 10-1000 倍）；
通过洗脱未结合的抗体，重复上述步骤实现多轮染色，最终在同一张切片上完成 2-7 种靶标（含 DAPI）的同步标记。
二、核心优势
多靶标原位检测：单张切片可实现 2-7 色染色（最多 6 标 7 色），突破传统 IHC 单色检测限制，直观展示靶标空间位置关系；
超高灵敏度：TSA 信号放大效应可检测低丰度靶标，灵敏度是传统方法的 100 倍以上；
无种属限制：可使用同一种属来源的一抗，避免种属交叉反应，降低抗体选择难度；
定量分析能力：结合数字病理扫描与图像分析软件，可实现靶标表达量、细胞亚群占比、共定位系数等定量数据输出；
样本兼容性强：适配石蜡切片、冰冻切片、组织芯片（TMA）等多种样本类型。
三、服务内容
mIHC 技术服务分为标准化套餐和定制化服务，主流服务商可提供 2-7 色的检测方案，具体如下：
服务名称 | 内容说明 | 实验周期 | 价格 |
荧光染色 | 组织单染 | 1周 | 咨询 |
组织双染 | 1周 | 咨询 | |
组织三染-TSA | 1-2周 | 咨询 | |
组织四染-TSA | 1-2周 | 咨询 | |
组织五染--TSA | 3-4周 | 咨询 | |
组织六染--TSA | 3-4周 | 咨询 | |
芯片荧光染色 | 1-2周 | 咨询 | |
拍照/扫描 | 共聚焦拍照 | 1周 | 咨询 |
芯片扫描（白光） | 1周 | 咨询 | |
普通扫描（白光） | 1周 | 咨询 | |
超大组织扫描（白光） | 1周 | 咨询 | |
荧光扫描单标双色（常规大小） | 1周 | 咨询 | |
荧光扫描双标三色（常规大小） | 1周 | 咨询 | |
荧光扫描三标四色（常规大小） | 1周 | 咨询 | |
荧光扫描四标五色（常规大小） | 1周 | 咨询 | |
荧光扫描五标六色（常规大小） | 1周 | 咨询 | |
荧光扫描六标七色（常规大小） | 1周 | 咨询 | |
荧光扫描芯片 | 1周 | 咨询 |
此外，组织芯片制作、数字切片扫描、图像定量分析（如阳性细胞占比、染色强度、共定位系数计算）等其他服务需求可详细沟通。
四、样本要求
客户需提供符合以下标准的样本，不同样本类型的具体要求如下：
样本类型 | 数量要求 | 保存与运输 |
石蜡切片 | （检测样本数 + 4）× 指标数 | 常温保存、常温运输 |
蜡块 | 含完整肿瘤 / 目标组织的蜡块 | 常温保存、常温运输 |
冰冻切片 | OCT 包埋，厚度 4-6μm | -20℃低温运输 |
抗体要求：客户需自备一抗（提供抗体说明书及稀释比例）。
五、服务流程
mIHC 技术服务为一站式流程，标准周期 2-3 周，具体步骤如下：
需求沟通：确认靶标组合、样本类型、检测指标及分析要求；
样本质控：检测样本完整性、固定质量，不合格样本需重新提供；
预实验：优化抗体稀释比例、染色条件，确保信号特异性；
正式实验：按 TSA 流程完成多色染色、切片封片；
扫描与分析：使用数字病理扫描仪获取高分辨率图像，通过软件进行定量分析；
结果交付：提供染色切片、原始图像及分析报告。
六、交付标准
服务商的交付物包含实物样本和数据文件两部分，具体如下：
实物：染色完成的组织切片（石蜡 / 冰冻）；
图像数据：200X 视野原图（3 个区域，含病灶 / 癌旁）、全片扫描图、单色信号拆分图；
分析报告：包含靶标表达量统计、细胞亚群占比、共定位分析结果、实验方法学说明。
七、应用领域
mIHC 技术广泛应用于基础科研、药物研发、临床诊断等领域，核心应用方向包括：
肿瘤微环境研究：分析免疫细胞（T 细胞、巨噬细胞）与肿瘤细胞的空间相互作用；
免疫治疗机制研究：检测 PD-1/PD-L1、CTLA-4 等免疫检查点的共表达；
神经科学：神经递质共定位、胶质细胞亚型鉴定；
药物研发：临床前药物靶点验证、疗效评估；
临床诊断：肿瘤分子分型、预后标志物检测（如非小细胞肺癌三级淋巴结构评估）
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