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实验常见问题解析

聚焦生命科学研究中核心实验技术的常见问题,我们针对实验流程、结果异常、操作难点等关键痛点提供专业解析与解决方案,助力科研人员高效排查实验问题、优化实验方案。
蛋白质免疫印迹(WB)
蛋白质免疫印迹(WB)
常见问题包括条带模糊、非特异性条带、无目的条带、条带拖尾等,多与蛋白表达量、样本制备、凝胶电泳参数、孵育条件、抗体条件等相关。
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免疫组织化学(IHC)
免疫组织化学(IHC)
易出现染色过浅 / 过深、背景染色过高、阳性信号定位不准确等问题,通常与抗原修复方式、抗体稀释比例、孵育时间及洗涤步骤等有关。
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多重荧光免疫组织/细胞化学检测(mIHC)
多重荧光免疫组织/细胞化学检测(mIHC)
常见问题有信号串扰、部分靶点检测不到、荧光信号衰减过快,主要受抗体选择、染色顺序、信号放大条件及荧光素稳定性等影响。
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免疫荧光(IF)
免疫荧光(IF)
易发生荧光信号弱、背景荧光高、细胞形态破坏等问题,多与荧光素标记效率、固定剂选择、抗体孵育条件及荧光显微镜参数设置等相关。
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免疫共沉淀(Co-IP)
免疫共沉淀(Co-IP)
常见问题包括沉淀效率低、非特异性结合蛋白过多、目的蛋白未检测到,与抗体条件、裂解液成分、孵育温度及洗涤强度等密切相关。
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酶联免疫吸附测定(ELISA)
酶联免疫吸附测定(ELISA)
易出现标准曲线线性差、样品检测值异常、显色不均匀等问题,通常与包被条件、封闭效果、酶标抗体浓度及底物反应时间等有关。
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流式细胞术(FCM)
流式细胞术(FCM)
常见问题有细胞分选纯度低、检测信号干扰、细胞聚团堵塞管路,多与样本制备(如单细胞悬液质量)、荧光抗体标记条件及仪器参数校准相关。
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染色质免疫沉淀(ChIP)
染色质免疫沉淀(ChIP)
易出现染色质片段化效果差、抗体富集效率低、背景 DNA 污染严重等问题,主要受甲醛交联条件、超声参数、抗体特异性及洗涤步骤等影响。
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