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多重荧光免疫组织/细胞化学检测(mIHC)

一 mIHC/多重荧光检测:

其原理是利用TSA技术(Tyramide Signal Amplification,酪胺信号放大技术),一种基于酶促反应的免疫检测信号放大方法,核心是利用辣根过氧化物酶(HRP)催化酪胺衍生物沉积,实现靶分子信号的高效增强;通过循环染色策略,突破传统IHC/IF靶标数量限制,实现对细胞/组织样本中多个靶蛋白的精准、高效、多重标记。

 

 

二 适用样本:

石蜡切片、冰冻切片、细胞

 

三 mIHC/多重荧光检测操作步骤 

 

四 石蜡切片操作流程

 

1.烘烤切片

2.脱蜡修复:

3.冷却与洗涤

4.过氧化物酶封闭

5.孵育一抗

6.孵育二抗

7.荧光染色

8.抗体剥离

9.循环一抗孵育、荧光染色及剥离

10.封片与观察

 

 

五 细胞爬片/冰冻切片操作流程

 

1. 固定(可选)、抗原修复(可选)、破膜(可选):

2.洗涤

3.过氧化物酶封闭

4.孵育一抗

5.孵育二抗

6.荧光染色

7.抗体剥离

8.循环一抗孵育、荧光染色及剥离

9.封片与观察


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